二、相萃结果与讨论
1、取法单因素实验
(1)(NH4)2SO4添加量对玛咖多糖提取率的玛咖影响
由图1可知,开始随着(NH4)2SO4添加量从10%增加到30%时,多糖的工玛咖多糖的艺研提取率在增加,由35.5%增加至40.9%,相萃这可能是取法NH4+和SO4+可以稳定大分子间的相互作用,使萃取体系更加稳定,玛咖多糖能更好地溶解在溶剂中;当(NH4)2SO4添加量增加到40%及以后,多糖的工玛咖多糖的艺研提取率呈减少趋势,这是相萃由于盐浓度过高会使多糖和水分子之间的氢键作用力被减弱,从而降低了多糖的取法提取率,因此初步选择液料比为10%~30%之间。玛咖
(2)叔丁醇添加量对玛咖多糖提取率的多糖的工影响
由图2可知,随着叔丁醇添加量的艺研增加,玛咖多糖的提取率也相应增加,在叔丁醇添加量在5mL~10mL之间,玛咖多糖提取率增加幅度较大,这可能是由于增加叔丁醇的含量和(NH4)2SO4的含量引起相互作用的结果,导致多糖提取率的增加;但是当叔丁醇添加量超过15mL后,玛咖多糖的提取率大幅下降,这可能是叔丁醇的含量过高不利于三相体系的稳定性,所以初步选择玛咖多糖的叔丁醇添加量在5~15mL之间。
(3)萃取温度对玛咖多糖提取率的影响
由图3可知,当玛咖多糖萃取温度在20℃~40℃之间逐渐增加时,玛咖多糖的提取率34.3%增加至41.5%,这可能是因为温度的增加让三相萃取溶液体系中分子热运动加快,这样玛咖多糖更容易从玛咖粉中进入到萃取溶液中,从而玛咖多糖的提取率增加;当萃取温度超过40℃以后,玛咖多糖的提取率出现下降,这可能温度增加超过一定范围后,虽然多糖分子的热运动速度增加了,但是与其他物质间的反应以及反应速率也在增加,提取出的玛咖多糖颜色也在加深,说明高温对玛咖多糖的活性也有影响,所以选择提取温度20℃~40℃进行响应面优化实验。
(4)水提次数对玛咖多糖提取率的影响
由图4可知,蒸馏水提次数对玛咖多糖的提取率影响不大,在提取1~4次范围内,多糖提取率都在42%左右波动。提取1次时,多糖提取率最低,为41.6%;提取4次时,多糖提取率最高,为42.1%,两种之间相差不大。从节约和经济的角度考虑,将提取次数定为1次,考虑到提取次数对玛咖多糖提取影响不明显,故而在响应面试验中提取次数不作为考察因子进行考虑。
2、响应面优化实验
由Design-Expert软件处理数据,方差分析结果见表2。对响应值与各个因素进行回归拟合,该模型对应的回归方程:
多糖提取率=43.4+1.6A+1.8B+1.2C-0.83AB-1.48AC0.33BC-2.14A2-7.79B2-4.24C2
由表3结果可知,整体模型P值<0.01,说明此时回归方差模型极显著,该试验方法可靠。方程失拟项也极显著,该回归模型与实测值能较好的拟合。其中A-(NH4)2SO4添加量,B-叔丁醇添加量对响应值影响显著(P<0.05),B2、C2对响应值影响极显著(P<0.01),各个因素对玛咖多糖得率影响大小顺序依次为:叔丁醇添加量(B)>(NH4)2SO4添加量(A)>萃取温度(C)。
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